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是一种在临床检验和生物医学研究中广泛使用的分析仪器,主要用于酶联免疫吸附试验(ELISA)。其基本工作原理如下:
1.抗原 -抗体反应原理
-在ELISA试验中,首先将已知的抗原或抗体固定于固相载体(如聚苯乙烯微孔板)上。当加入含有相应抗体或抗原的样本时,样本中的抗体或抗原会与固相载体上的抗原或抗体特异性结合,形成抗原 -抗体复合物。这种特异性结合是基于抗原和抗体之间的互补性,就像钥匙和锁一样,只有特定的抗原和抗体才能相互匹配结合。
2.酶标记与底物反应原理
-然后,加入带有酶标记的抗体或酶标记的抗原。这些酶标记物会与之前形成的抗原 -抗体复合物中的相应成分结合。例如,在双抗体夹心法ELISA中,待测抗原先与固相抗体结合,再与酶标抗体结合。
-加入酶的底物。酶会催化底物发生化学反应,产生有色产物。例如,辣根过氧化物酶(HRP)常用的底物是邻苯二胺(OPD)或四甲基联苯胺(TMB)。HRP可以催化底物氧化,生成有色的产物,颜色的深浅与样本中抗原或抗体的含量成正比。
3.光学检测原理
-raybet雷竞技下载通过光学系统来检测反应产生的有色产物的吸光度。仪器中的光源(通常是卤钨灯)发出光线,经过一系列光学元件(如滤光片、光栅等)后,变成特定波长的单色光照射到反应孔上。反应孔中的有色产物会吸收部分光线,未被吸收的光线则透过反应孔被光电探测器(如光电管或光电二极管)接收。
-根据朗伯 -比尔定律,吸光度与溶液中有色物质的浓度成正比。仪器通过测量吸光度,就可以间接计算出样本中抗原或抗体的含量。